蛋白免疫印迹实验（Western Blot）是一种用于检测和分析特定蛋白质在细胞或组织中的表达情况的实验技术。它利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）将样品中的蛋白质按照分子量大小进行分离，然后通过电转移的方式将蛋白质转移到固相膜（如硝酸纤维素膜或PVDF膜）上。接着，利用特异性抗体与膜上的蛋白质进行免疫反应，通过显色或荧光检测等手段，可以直观地观察到目标蛋白质的存在与否及其表达量的多少。 在Western Blot实验中，分离胶的浓度是影响蛋白质分离效果的关键因素之一。选择合适的分离胶浓度，可以使目标蛋白质在电泳过程中得到良好的分离，从而获得清晰、准确的实验结果。 以下是一些选择分离胶浓度的基本原则： 🔷低浓度分离胶（如5%-8%）：适合分离大分子量蛋白质（大于200 kDa）。由于低浓度凝胶的孔径较大，大分子量蛋白质可以更容易地通过，从而实现良好的分离效果。 🔷中等浓度分离胶（如10%-12%）：常用于分离中等分子量范围的蛋白质（25-200 kDa）。这是Western Blot实验中最常用的分离胶浓度范围，适用于大多数蛋白质的分离。 🔷高浓度分离胶（如15%及以上）：适合分离小分子量蛋白质（10-40kDa）。高浓度凝胶的孔径较小，可以限制小分子量蛋白质的迁移速度，从而实现有效的分离。 浓缩胶的浓度通常比分离胶低，常用的浓度有4%、5%等。浓缩胶的主要作用是浓缩样品中的蛋白质，使其在电泳过程中形成狭窄的条带，便于后续的分离和检测。分离胶浓度要根据蛋白分子量来选择 蛋白 研究生 细胞生物实验 wb wb实验 蛋白质免疫印记 生物学 实验指导